高三实验专题复习
考试说明要求的16个课本实验
必修一
1.用显微镜观察多种多样的细胞 P7
2.检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 P18
3.观察DNA、RNA在细胞中的分布 P26
4.观察线粒体和叶绿体 P47
5.观察植物细胞的质壁分离和复原 P61
6.探究影响酶活性的因素 P78、P83
7.叶绿体色素的提取和分离 P97
8.探究酵母菌的呼吸方式 P91
9.观察细胞的有丝分裂 P115
10.模拟探究细胞表面积与体积的关系 P110
必修二
11.观察细胞的减数分裂 P21
12.低温诱导染色体加倍 P88
13.调查常见的人类遗传病 P91
必修三
14.探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用 P51
15.探究培养液中酵母菌数量的动态变化 P68
16.土壤中动物类群丰富度的研究 P75
课本隐性实验（经典实验）
1、验证光合作用产生淀粉
2、验证光合作用释放O2
3、验证光合作用需要CO2
4、验证光合作用需要光照
5、验证细胞膜流动性实验
6、肺炎球菌转化实验
7、噬菌体侵染细菌实验
8、孟德尔杂交实验
9、DNA杂交实验
10、动物激素实验
光合作用
（一）显微观察类
（二）生化鉴定类
（三）探究类
（四）调查类
三、实验归类:
☻物质的鉴定与提取、分离实验

☻观察实验
☻有关酶的实验（生化）

☻生态调查及实验
归类方法一：
生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定；DNA的提取与鉴定；叶绿体中色素的提取与鉴定
比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率；探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用；探索影响淀粉酶活性的三个条件
用高倍显微镜观察叶绿体和细胞质的流动；观察植物细胞的有丝分裂；观察植物细胞的质壁分离与复原；植物向性运动的设计与观察
种群密度的取样调查；设计并制作小生态瓶；观察生态系统的稳定性并设计农业生态系统
☻观察鉴定法：
☻示踪原子法：

☻等组实验法：

☻杂交实验法：

☻化学分析法：
☻模拟实验法：
还原性糖、蛋白质、脂肪的鉴定、植物细胞有丝分裂观察、叶绿体、细胞质的观察等。
噬菌体侵染细菌的实验、用18O和14CO2追踪光合作用中氧原子和碳原子转移途径、3H标记亮氨酸追踪分泌蛋白的合成和分泌过程等。
淀粉酶催化淀粉水解的实验，植物激素与向性。
一对、两对相对性状的杂交遗传
叶绿体色素的提取与分离、DNA的粗提取
渗透作用的实验装置、分离定律的模拟实验等。
归类方法二：
四、中学生物实验包含的基本技术
（1）玻片标本技术
压片法

装片法
涂片法
切片法
取材 解离 漂洗 染色 制片（压片） 观察
例：有丝分裂;低温诱导染色体数目加倍
材料在载玻片水滴中展平；染色
放盖玻片从一侧慢慢盖在水滴上，防止气泡产生
改变溶液浓度时从一侧滴，另一侧吸水纸吸（引流法）
例：观察叶绿体；质壁分离和复原实验；制备细胞膜
例：观察动物如人体血液中的细胞；观察DNA和RNA在细胞中分布（人体口腔上皮细胞）
例：生物组织中脂肪鉴定
（2）染色技术（染色便于观察）
龙胆紫
醋酸洋红
改良苯酚品红
甲基绿
吡罗红
健那绿
亚甲基兰
染色体
紫色
染色体
红色
DNA
绿色
RNA
红色
线粒体
蓝绿色
活体染色
细菌氧化使之褪色，检测污水中好氧性细菌
（活体染色）
（活体染色）
染色体
红色
鉴定试剂（鉴定化学反应，是否物质存在）
斐林试剂
苏丹Ⅲ（Ⅳ）试剂
双缩脲试剂
二苯胺试剂
碘液
重铬酸钾溶液（H+）
溴麝香草酚蓝试剂
还原糖（葡、果）
砖红色
脂肪
橘黄色（红色)
蛋白质
紫色
DNA
蓝色
淀粉
蓝色
酒精
二氧化碳
橙色→灰绿色
蓝→绿→黄
（3）纸层析技术
（6）显微镜使用的基本技术
取样液 制备滤纸条 点样液 层析 观察结果
例：色素提取和分离
（4）恒温技术 （水浴和恒温箱）
例：酶的催化反应；观察DNA和RNA在细胞中分布
（5）研磨和过滤技术
例：色素提取和分离
五、材料选择要满足实验要求：

无色材料：还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
观察细胞中DNA、RNA的分布

有色材料： 叶绿体中色素的提取和分离取选择新鲜绿
观察植物细胞的质壁分离与复原

活 材 料： 观察植物细胞的质壁分离与复原
高倍显微镜的使用和观察叶绿体
(观察植物细胞的有丝分裂)
五、材料选择满足实验要求：
①可溶性还原性糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖)鉴定中含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。
不宜选择甜菜、甘蔗等，因为这些材料中主要的糖类为不具还原性的蔗糖；(淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。)
②观察叶绿体和细胞质流动时，选择菠菜叶下表皮稍带叶肉（叶表皮细胞没有叶绿体，而靠近下表皮的叶肉细胞中含少而较大的叶绿体）或用藓类（叶片薄、叶绿体大），观察时应选择靠近叶脉部位细胞（叶脉附近细胞中水含量丰富，细胞质流动明显）；
五、材料选择满足实验要求：

③观察有丝分裂实验时，选择幼小根尖或动物 受精卵 （减数分裂选择雄性生殖器官）

④观察质壁分离和复原实验时,紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞（具紫色大液泡），便于观察；

⑤进行DNA提取和鉴定实验时不能选用哺乳动物红细胞作为材料；可选用鸡血、动物肝脏
植物材料有：
显微镜观察实验
取材→解离→漂洗→染色→制片
取材、直接制片
取材、直接制片
取材、制片
低倍镜的使用、低倍镜到高倍镜的转换、熟练使用高倍镜、熟练进行对光、对焦、调节视野光线的强弱等一系列操作
正确选择观察的参照
明确观察目标
寻找、识别观察目标
观察、对比
1.用显微镜观察多种多样的细胞 P7
光学显微镜
(1)如何根据结构区分目镜与物镜？
(2)其长短与放大倍数之间存在怎样的关系？
①物镜越长，放大倍数越大。
②目镜越长，放大倍数越小。
二、显微镜的使用
(1)先用低倍镜观察
“取镜→安放→对光→放片→观察”
(2)再换高倍镜观察
① 把所要观察的物像移到视野的中央。
② 直接转动转换器，换上高倍镜观察。
③ 再调节细准焦螺旋，直至看到清晰的物像。
④ 若视野较暗，可调节光圈或反光镜。
实验原理
1、甲基绿使DNA呈绿色;
吡罗红使RNA呈红色.
2、盐酸能改变细胞膜的通透性,
加速染色剂进入细胞，同时
使染色体中的DNA与蛋白质分离。
材料:
动、植物细胞
如：人的口腔上皮细胞、洋葱内表皮细胞
3.观察DNA、RNA在细胞中的分布 P26
方法步骤：
实验原理
4.观察线粒体和叶绿体 P47
观察叶绿体
取材：
黑藻叶
菠菜叶
观察线粒体
载玻片中央滴一滴健那绿染液，涂上人口腔上皮细胞
健那绿染液使活细胞线粒体呈蓝绿色
5.观察植物细胞的质壁分离和复原 P61
材料用具：
洋葱鳞片叶外表皮
液泡大且有颜色易观察
方法步骤：
1.制作洋葱鳞片叶外表皮的临时装片
2.观察植物细胞的初始状态
3.观察植物细胞失水状态
4.观察植物细胞吸水状态
自身对照
2、实验步骤：
在载玻片上滴一滴蒸馏水。
撕取洋葱鳞片叶。
放在水滴中展平。
在盖玻片的一侧滴入0.3g/ml的蔗糖溶液。在另一侧用吸水纸吸引，重复几次。
液泡变小，颜色变深，原生质层与细胞壁分离。
质壁分离
质壁分离复原
Ⅱ、方法步骤
（1）根尖培养
（2）装片制作：解离→漂洗→染色→制片
（3）观察：低倍镜观察 →高倍镜观察
Ⅰ、 实验原理
9.观察细胞的有丝分裂 P115
根尖的培养
培养根尖：应每天换水 (防止水中缺氧烂根)
取材：上午10点至下午2点，取根尖2-3mm。
解离：解离液（15%盐酸∶95%酒精溶液＝1∶1）；
时间：室温3-5分钟，至根尖酥软；
目的：使组织中的细胞分离开来。
漂洗：用清水漂洗10min，目的是洗去组织中的解
离液，防止解离过度；便于染色(防止酸碱中和)。
染色：（龙胆紫溶液或醋酸洋红染液）3－5分钟；
目的是使染色体或染色质被碱性染料染色，便于观察。
制片
方法：用镊子弄碎根尖，盖上盖玻片，再放上一块载玻片，压片。
目的：使细胞分散开。
低倍镜观察：找到分生区细胞（特点：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞处于分裂期）
高倍镜观察：
实验三、观察植物细胞的有丝分裂
（1）解离——使组织中的细胞相互分裂开来；使细胞死亡。
（2）如果解离时间过短会造成什么后果？



（3）如果漂洗不干净会有什么结果？
如果解离时间过短，就不能使细胞之间的连接分开，造成压片失败，细胞不能均匀地在装片上铺成一层。
如果漂洗不干净，沾在洋葱根尖上的盐酸与酒
精就会和龙胆紫反应，造成根尖细胞染色体不
能染上颜色。
4）在分生区的特点中，能不能看到细胞正在分裂？ 在分生区特点中，细胞排列紧密=整齐？
不能，因为解离杀死了细胞。
（ 整齐可以是紧
密的，也可能是疏松的）
2．(2010天津卷)在“观察根尖分生组织细胞的有丝分裂”实
验中，以下操作和结论正确的是
A．剪取5cm根尖，用酒精和吡罗红混合液解离染色
B．右图是高倍显微镜下调解细准焦螺旋看到的视野
C．持续观察，视野中的K细胞将分裂成两个子细胞
D．视野中，N细胞的染色体数目是M细胞的一半
4．(2011山东卷)只有在保持细胞活性的条件下，才能显示细胞中某物质或结构的实验是
A．苏丹Ⅲ染色体观察花生种子子叶细胞中的脂肪
B．龙胆紫染色观察洋葱根尖分生区细胞的有丝分裂
C．健那绿染色观察动物细胞的线粒体
D．甲基绿、吡罗红染色观察动物细胞中的DNA和RNA
5．(2011江苏卷)将有关生物材料直接制成临时装片，在普通光学显微镜下可以观察到的现象是
A．菠菜叶片下表皮保卫细胞中具有多个叶绿体
B．花生子叶细胞中存在多个橘色脂肪粒
C．人口腔上皮细胞中线粒体数目较多
D．紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞中细胞核清晰可见
6．(2012山东卷)某小组进行观察洋葱根尖分生组织细胞有丝分裂的实验，下列关于该实验的叙述正确的是
A．盐酸和酒精混合液主要起固定作用
B．碱性染料吡罗红可用于染色体染色
C．观察到分裂末期细胞内细胞板向四周扩展形成新的细胞壁
D．细胞内染色体的存在状态可作为判断有丝分裂各时期的依据
15．(2013山东)生物实验中常用盐酸处理实验材料。下列说法正确的是
A．盐酸解离根尖的同时也为龙胆紫染色创造酸性环境
B．盐酸处理染色质能促进DNA与吡罗红结合
C．盐酸浓度过高会破坏过氧化氢酶的空间结构导致其失活
D．盐酸处理细胞有利于健那绿对线粒体染色
16.(2008江苏卷)在完成观察洋葱根尖分生区细胞有丝分裂实验后，教师给学生提供一份“实验报告”的部分内容
(一)解离：剪取洋葱根尖5cm，放入盛有质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精混合液(体积比为1:1)的玻璃皿中，在室温下解离3～5min。
(二)染色：把根尖放在盛有0．01g/mL龙胆紫溶液的玻璃皿中染色3～5min。
(三)漂洗：将根尖放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10min。
(四)制片：将根尖放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子把根尖弄碎，盖上载玻片，用拇指轻轻按压载玻片……
⑴请改正“实验报告”中的3处错误。

⑵有些因素会影响细胞周期各时期的长短，实验过程中也会产生一些误差。因而对整个实验结果可能产生影响的有________。
①取材时间 ②根尖培养温度 ③解离时间长短 ④载玻片厚度
⑤计数的细胞是否属于分生区细胞 ⑥细胞周期各时期区分是否准确
11.观察细胞的减数分裂 P21

实验材料：
蝗虫等精巢
一、实验原理

低温抑制纺锤体的形成,以致影响染色体被拉向两极,细胞不能分裂成两个子细胞,于是染色体数目加倍。
12.低温诱导染色体加倍 P88
二、方法步骤
1.根尖培养
2.低温诱导

3.固定

4.制作装片
5.显微镜观察
解离→漂洗→染色→制片
三、试剂及用途
1.卡诺氏液:固定细胞形态。
2.体积分数为95%的酒精：洗去卡诺氏液。
3.解离液(体积分数15%盐酸和体积分数95%酒精1∶1混合液):使组织中的细胞相互分离开。
4.清水：洗去解离液，防止解离过度，便于染色。
5.改良苯酚品红染液:使染色体着色。
(龙胆紫溶液、醋酸洋红溶液)
实验设计缺陷？ 缺乏对照实验
注意事项
(1)实验过程中,与“观察植物细胞的有丝分裂”一样,所观察的细胞已经被卡诺氏液、解离液等杀死了,最终在显微镜下看到的是死细胞。
(2)选材的时候必须选用能够进行分裂的分生组织,不分裂的细胞染色体不复制,不会出现染色体数目加倍的情况。
(3)观察到少数细胞的染色体数目发生变化。
10．下表是用洋葱为材料做的实验，其中实验名称、观察部位和实验现象都正确的是
1.(2010·福建高考)下列关于低温诱导染色体数目加倍实验的叙述,正确的是(　　)
A.原理:低温抑制染色体着丝点分裂,使子染色体不能分别移向两极
B.解离:盐酸酒精混合液和卡诺氏液都可以使洋葱根尖解离
C.染色:改良苯酚品红染液和醋酸洋红溶液都可以使染色体着色
D.观察:显微镜下可以看到大多数细胞的染色体数目发生改变
砖红色沉淀
橘黄色/红色
紫色
蓝色
还原糖 + 斐林试剂 →
脂 肪 + 苏丹Ⅲ/IV →
蛋白质 + 双缩脲试剂→
淀 粉 + 碘 →
生化鉴定类
2.检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质P18
梨匀浆、花生种子、豆浆、马铃薯匀浆
实验原理：
实验材料：
斐林试剂:
甲液：质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液；
乙液：质量浓度为0.05g/ml的CuSO4溶液；
双缩脲试剂：
A液：质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液，1mL
B液：质量浓度为0.01g/ml的CuSO4溶液,4滴。
甲乙液等量混合，现配现用
方法一:花生种子匀浆+3滴苏丹Ⅲ染液→_______
方法二:
取材:花生种子(浸泡,去掉种皮),将子叶切成薄片

制片
　
观察:先在___________下寻找已着色颗粒,再用高倍显微镜观察
　
结论:圆形小颗粒呈_______,说明有脂肪存在
取最薄的切片，放在载玻片中央
滴2～3滴_______染液(染色3 min)
去浮色(1～2滴体积分数为50%的酒精溶液)
制成临时装片(滴一滴蒸馏水，盖上盖玻片)
橘黄色
苏丹Ⅲ
低倍显微镜
橘黄色
脂 肪 检 测
8.(2012广东卷)分析下表，可推测
注：“+”显色，“++”显色更深；“-”不显色.
A.甲溶液含有淀粉 B.乙溶液含有还原糖
C.混合溶液不含淀粉 D.混合溶液含有淀粉酶
捕获光能的 分布在类囊体的薄膜上
色素
7.叶绿体色素的提取和分离 P97
叶绿素a和b主要吸收蓝紫光和红光。
胡萝卜素和叶黄素主要吸收蓝紫光。
【实验原理】
1．色素提取的原理
绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中，可以用无水乙醇提取叶绿体中的色素。
2．色素分离的原理
(1)绿叶中的色素在层析液中溶解度不同：溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快；溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。
(2)利用纸层析法将不同色素分离开。
几种化学试剂的作用
(1)无水乙醇：
(2)层析液：
(3)二氧化硅：
(4)碳酸钙：
提取色素
分离色素
使研磨得更加充分。
防止在研磨时，叶绿体中的
色素受到破坏。
1.提取色素
2.制备滤纸条
【实验步骤】
10ml无水乙醇
10cm
1cm
3.画滤液细线

4.分离色素
5.观察结果
适量
分离结果
滤纸上色带的排列顺序如何？宽窄如何？说明什么？
9．(2012上海卷)图6表示叶绿体色素提取分离实验中纸层析的结果，据图判断用作实验材料的叶片颜色为
A．红色 B．黄色 C．绿色 D．紫色
14．(2013江苏)关于叶绿体中色素的提取和分离实验的操作,正确的是
A．使用定性滤纸过滤研磨液
B．将干燥处理过的定性滤纸条用于层析
C．在划出一条滤液细线后紧接着重复划线2~3次
D．研磨叶片时,用体积分数为70%的乙醇溶解色素
探究类
6.探究影响酶活性的因素 P78、P83
过酸、过碱或温度过高，会使酶的空间结构遭到破坏，使酶永久失活；低温使酶活性明显下降，但在适宜温度下其活性可以恢复。
1.温度对酶活性的影响：
60℃热水
冰块
蓝色
碘液
蓝色
过氧化氢酶催化H2O2分解？
斐林试剂？
2.pH对酶活性的影响
泡产生
有大量气
的NaOH
1 mL 5%
产生
无气泡
单一变量原则
7．(2010四川卷)下列对实验的相关叙述，正确的是
A．探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的专一性作用时，可用碘液替代斐林试剂进行鉴定
B．纸层析法分离叶绿体色素的实验结果表明，叶绿素b在层析液中溶解度最低
C．调查人群中某种遗传病的发病率时，应选择有遗传病史的家系进行调查统计
D．鉴定蛋白质时，应将双缩脲试剂A液和B液混合以后再加入待检组织样液中
18．(2010海南卷)为探究NaCl和CuSO4对唾液淀粉酶活性的影响，某同学进行了实验，实验步骤和结果见表。请回答：
⑴实验中加入缓冲液的作用是_______________________。
⑵分析实验结果可知：对酶活性有影响的离子是___，其中对酶活性有抑制作用的离子是____，对酶活性有促进作用的离子是____ 。
⑶该实验中设置4号试管的目的是_____；设置3号试管的目的是_____。
⑷上述实验中若用斐林试剂代替碘溶液进行检测，1～4号试管中的颜色依次是____、_____、______、______。根据上述实验结果，在操作过程中，保温之前不能加入斐林试剂，其原因是_____。
8.探究酵母菌的呼吸方式 P91
细胞呼吸产物鉴定原理
1. CO2 ＋ Ca(OH)2 → CaCO3
2. CO2 ＋ 溴麝香草酚蓝溶液 → 黄
实验方法:探究细胞呼吸的方式
选用下面对照装置，可以根据红色液滴移动方向来探究细胞的呼吸类型。
3．某实验小组将玉米幼苗置于一密闭容器内，测定温度对光合作用和细胞呼吸的影响(用容器内CO2的变化量表示)。实验结果如下(“＋”表示增加，“－”表示减少)，下列有关说法正确的是
A．由表中数据可知，光合作用酶和细胞呼吸酶的最适温度相同
B．在适宜光照下，35℃时光合速率小于呼吸速率
C．由表可知，在适宜光照下，最有利于植物生长的温度是30℃左右
D．在黑暗情况下，叶肉细胞内无ATP的形成
17．(2009江苏卷)回答下列与细胞有关的实验问题。
⑴下列4项实验中，需保持细胞生理活性的有 (填序号)。
①观察叶绿体和原生质的流动 ②观察洋葱鳞片叶内表皮细胞中DNA的分布
③探究酵母菌的呼吸方式 ④红细胞中血红蛋白的提取和分离
⑵按下面步骤进行质壁分离实验。
步骤一：在洁净的载玻片中央加一滴清水，取一片藓类小叶，盖上盖玻片。
步骤二：从盖玻片一侧滴入0．3g／mL的蔗糖溶液，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。这样重复几次，使盖玻片下面的藓类小叶浸润在0．3 g／mL的蔗糖溶液中。
步骤三：在显微镜下观察，结果如图所示。①图中A、B处的颜色分别是 。②如果上述实验步骤二中从盖玻片的一侧滴入的是加有伊红(植物细胞不吸收的红色染料)的0．3 g／mL的蔗糖溶液，则在显微镜下观察到A、B处颜色分别是 。
③如果将上述实验步骤二中浸润在0．3 g／mL的蔗糖溶液中的藓类小叶的装片，放在80℃条件下处理一段时间(装片中的藓类小叶保持在0．39／mL的蔗糖溶液中)。在显微镜下清晰地观察到细胞结构后，为更准确地判断A处颜色，对显微镜的操作方法是 、 。
如果A处呈绿色，可能的原因是 。
模拟探究细胞表面积与体积的关系 P110
通过探究细胞大小，即细胞的表面积与体积之比，与物质运输效率之间的关系，探讨细胞不能无限长大的原因。
测量方法
结论：琼脂块的相对表面积随着琼脂块的增大而_______；NaOH扩散的体积与整个琼脂块的体积之比随着琼脂块的增大而_______。
减小
减小
探索生长素类似物促进插条生根的最适浓度P51
自变量
因变量
影响实验的无关变量
温度、光照、插条的生长状况、带有的芽数、插条处理的时间等。
（1）预实验
（2）正式实验
在预实验的结果上，缩小生长素类似物的浓度范围，进行实验。
实验流程
为进一步的实验摸索条件,也可以检验实验设计的科学性和可行性,避免盲目开展实验而造成人力、物力和财力的浪费。
1.制作插条
把生长状况相同的枝条平均分成10组,每组3枝。
2.分组处理
生长素类似物按不同比例稀释成9份,第10份用_______作为空白对照。把10组枝条基部分别浸入浸泡液中,处理1天。
处理方法:
(1)浸泡法:把插条的基部浸泡在配制好的溶液中,深约3cm,处理几小时至一天。(要求溶液的浓度_____,并且最好是在遮阴和空气湿度较高的地方进行处理。)
(2)沾蘸法:把插条基部在_________的药液中蘸一下(约5s),深约1.5cm即可。
蒸馏水
较低
浓度较高
实验步骤
3.实验培养
把每组处理过的枝条下端分别放入清水中浸泡,放在适宜温度下培养,每天观察一次,记录生根情况。
4.分析结果,得出实验结论
3.实验培养
把每组处理过的枝条下端分别放入清水中浸泡,放在适宜温度下培养,每天观察一次,记录生根情况。
4.分析结果,得出实验结论
如果观察到插条不能生根,可能的原因有哪些?
有可能枝条所带叶片较多,蒸腾作用过强,失水太多;
有可能枝条幼芽、幼叶保留较多,本身合成一定浓度的生长素,浸泡后形态学下端处于高浓度的抑制状态;
有可能没有分清形态学的上端与下端。
13.(2013·福建高考)下列为减少实验误差而采取的措施，错误的是(　　)
B
19.(2009年山东)用适宜浓度的2,4－D处理番茄花蕾可提高坐果率(自然状态下果树实际结果数占总开花数的百分率)。请设计实验方案。确定施用2，4-D的最适浓度。
实验方案：
①将____________相同的番茄平均分成若干组
②配置对应组数的_________