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第三章 基因的本质
第一节 DNA是主要的遗传物质
一、DNA是遗传物质的证据
(一).间接证据(早期推测)
1:蛋白质是遗传物质(20世纪20年代)
各种氨基酸可以按照不同的方式排列,形成不同的 。氨基酸多种多样的排列顺序,可能蕴含着 。
蛋白质
遗传信息
结论: 是遗传物质。
蛋白质
稳定
DNA
蛋白质
DNA
DNA
连续
2:DNA是遗传物质
遗传物质必须具备的特点
1、具有存储巨大数量信息的可能
2、在生长和繁殖过程中能精确的自我复制
3、能指导蛋白质的合成从而控制生物的性
状和新陈代谢
4、分子结构相对稳定(但特殊情况下能产
生变异)
问题:两种不同的推测如何求证呢?
一、DNA是遗传物质的证据
(二).直接证据
1、肺炎双球菌转化实验
(1)格里菲思转化实验(体内转化)
两种菌落的比较
无毒
有毒
(1)格里菲思转化实验(体内转化)
①注入R型活细菌,小鼠不死亡。
②注入S型活细菌,小鼠死亡。
④R型活细菌和加热杀死的S型细菌混合后注入,小鼠死亡。
③注入加热杀死的S型细菌,小鼠不死亡。
(1) 格里菲思转化实验(体内转化)
(1)格里菲思转化实验(体内转化)
实验结论:
已经被加热杀死的S型细菌中,必然含有某种促成这一转化的活性物质——
实验结果:从第四组小鼠体内分离出了有毒性的S型活细菌
转化因子
特别强调:将S型菌杀死,实质上是使细菌的蛋白质变性,失去活性。蛋白质加热到一定程度,蛋白质分子的结构(空间结构)会被破坏,从而失去生物活性。但是细菌的DNA是不会失去活性的,因为DNA加热后变成单链,但只要冷却后就又会恢复双螺旋状态。
+
肺炎双球菌转化作用图解
转化的S型菌
特别说明:
转化作用的实质是外源DNA与受体之间的重组,使受体细胞获得了新的遗传信息。
其导致的变异类似于基因工程,故应界定为基因重组。
(1)格里菲思转化实验(体内转化)
本实验体现了一个完整的科学发现过程的一部分,即发现问题―→ 提出假说―→实验验证―→得出结论的前两步,后两步由艾弗里完成。
如果请你设计一个实验来确定转化因子,你的实验设计思路是什么?
(2)艾弗里转化实验(体外转化)
S型细菌
分别与R型活细菌培养
R型
R型
R型与S型
分 离
多糖
蛋白质
DNA
DNA酶
R型
(2)艾弗里转化实验(体外转化)
实验结果:①只有加入DNA才转化;
②DNA越纯,转化越有效;
③用DNA酶处理DNA,不再转化。
实验结论:转化因子是DNA,蛋白质、多糖及DNA的水解产物都不是。
艾弗里的实验有什么不足之处?
受技术限制DNA无法100%提纯,总含少量蛋白质。因此,仍有人对实验结论表示怀疑。
【例1】在肺炎双球菌的转化实验中,能够证明DNA是遗传物质的最关键的实验设计是( )
A.将无毒R型活细菌与有毒S型活菌混合后培养,发现R型菌转化为S型菌
B.将无毒R型菌与加热杀死的S型菌混合后培养,发现R型菌转化为S型菌
C.从加热杀死的S型菌中提取DNA,蛋白质和多糖等,加入培养R型菌的培养基中,发现R型菌转化为S型菌
D.从加热杀死的S型菌中提取DNA,蛋白质和多糖等,分别加入培养R型菌的培养基中,发现只有加入DNA,R型菌才转化为S型菌
D
例(08江苏)某研究人员模拟肺炎双球菌转化实验,进行了以下4个实验:
①S型菌的DNA+DNA酶→加入R型菌→注射入小鼠
②R型菌的DNA+DNA酶→加入S型菌→注射入小鼠
③R型菌+DNA酶→高温加热后冷却→加入S型菌的DNA
→注射入小鼠
④S型菌+DNA酶→高温加热后冷却→加入R型菌的DNA
→注射入小鼠
以上4个实验中小鼠存活的情况依次是 ( )
A.存活、存活、存活、死亡
B.存活、死亡、存活、死亡
C.死亡、死亡、存活、存活
D.存活、死亡、存活、存活
D
2、将加热杀死的S型细菌与R型细菌混合后,注射到小鼠体内,在小鼠体内S型、R型细菌的含量变化情况如图所示:
a、从免疫学角度解释:曲线ab段下降的原因是
R型菌被小鼠的免疫系统所消灭
b、曲线bc段上升的原因是
部分R型细菌转化
为有毒S型细菌后在小鼠体内增殖,导致小鼠
的免疫力下降
0
含量
时间
a
b
c
R型细菌
S型细菌
练习:
肺炎双球菌转化实验
1.体内和体外转化实验的比较
格里菲思
艾弗里及其同事
在小鼠体内
体外培养基
R型细菌与S型细菌的毒性对照
S型细菌各成分的作用进行对照
加热杀死的S型细菌能使R型细菌转化为S型细菌
S型细菌的DNA 能使R型细菌转化为S型细菌
S型细菌体内有“转化因子”
S型细菌的DNA 是遗传物质
用加热杀死的S型细菌注射到小鼠体内作为对照实验来说明确实发生了转化
将物质提纯分离后,直接地、单独地观察某种物质在实验中所起的作用
(1)所用材料相同;
(2)体内转化实验是体外转化实验的基础,
体外转化实验是体内转化实验的延伸;
(3)两实验都遵循对照原则、单一变量原则
2.肺炎双球菌转化实验中的相互对照
相互对照时每组均既是实验组又是对照组,每个实验组除要探究的因素各不相同外,其他条件均相同,最终结论必须由几组实验结果对比得出。
(三)、噬菌体侵染细菌的实验
研究材料:噬菌体
1952,赫尔希和蔡斯
① 营寄生生活
② 在自身遗传物质的指导下进行繁殖
③ 繁殖原料来自大肠杆菌
④ 子代噬菌体从宿主细胞裂解释放。
噬菌体的结构
噬菌体的繁殖
1.实验方法:
同位素示踪法
蛋白质的组成元素:
DNA的组成元素:
C、H、O、N、S
C、H、O、N 、P
(标记32P)
(标记35S )
标记细菌:在分别含有放射性同位素32P 和35S的培养基中培养细菌
2.实验过程
噬菌体侵染细菌
检测放射性
标记噬菌体:分别用上述细菌培养T2噬菌体,获得含32P的噬菌体和含35S的噬菌体
含35S的噬菌体
含32P的噬菌体
同位素标记噬菌体
含35S
含32P
蛋白质
DNA
离心
离心
离心
32P
离心
32P
32P标记DNA
35S标记蛋白质
有32P标记DNA
无35S标记蛋白质
DNA有32P标记及31P
衣壳蛋白无35S标记
在亲子代之间具有连续性的物质是DNA,即DNA是遗传物质。
3.实验结论:
标记细菌
标记噬菌体
标记噬菌体侵染未标记细菌
搅拌离心测定放射性
结果分析
4.上清液和沉淀物放射性分析
(1)用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌,上清液中含放射性的原因:
①保温时间过短,有一部分噬菌体还没有侵染到大肠杆菌细胞内,经离心后分布于上清液中,上清液中出现放射性。
②保温时间过长,噬菌体在大肠杆菌内增殖后释放子代,经离心后分布于上清液,也会使上清液中出现放射性。
(2)用35S标记的噬菌体侵染大肠杆菌,沉淀物中有放射性的原因:由于搅拌不充分,有少量含35S的噬菌体吸附在细菌表面,随细菌离心到沉淀物中。
【高考警示钟】
1.噬菌体侵染细菌实验中的标记误区
(1)该实验不能标记C、H、O、N这些DNA和蛋白质共有的元素,否则无法将DNA和蛋白质区分开。
(2)35S(标记蛋白质)和32P(标记DNA)不能同时标记在同一噬菌体上,因为放射性检测时只能检测到存在部位,不能确定是何种元素的放射性。
2.噬菌体侵染细菌实验与艾弗里的肺炎双球菌转化实验的方法不同
(1)前者采用放射性同位素标记法,即分别标记DNA和蛋白质的特征元素(32P和35S);
(2)后者则采用直接分离法,即分离S型细菌的DNA、多糖、蛋白质等,分别与R型细菌混合培养。
〖例〗针对耐药菌日益增多的情况,利用噬菌体作为一种新的抗菌治疗手段的研究备受关注,下列有关噬菌体的叙述,正确的是( )
A.利用宿主菌的氨基酸合成子代噬菌体的蛋白质
B.以宿主菌DNA为模板合成子代噬菌体的核酸
C.外壳抑制了宿主菌的蛋白质合成,使该细菌死亡
D.能在宿主菌内以二分裂方式增殖,使该细菌裂解
A
二.RNA是遗传物质的证据——烟草花叶病毒(TMV)对烟草的感染与重建
烟草花叶病毒(简称TMV),其基本成分是蛋白质和RNA,体内无DNA。为查明其遗传物质,1957年格勒和施拉姆进行了如下实验:
三、DNA是主要遗传物质
(一)RNA是遗传物质的实验依据
烟草花叶病毒
感染烟草
提取蛋白质
感染烟草
提取RNA
感染烟草
结论:RNA是烟草花叶病毒的遗传物质,
蛋白质不是烟草花叶病毒的遗传物质 。
三、对“DNA是主要的遗传物质”的理解
(1)一切生物的遗传物质是核酸(DNA或RNA)。
(2)凡细胞生物(不论是真核生物还是原核生物),其遗传物质都是DNA,其细胞中的RNA只是遗传信息表达的媒介。
(3)DNA病毒(如噬菌体)的遗传物质是DNA;只有极少数RNA病毒的遗传物质是RNA。
结论:绝大多数生物的遗传物质是DNA,即DNA是主要的遗传物质。
例:人类对遗传物质本质的探索经历了漫长的过程,下列有关叙述正确的是( )
A. 孟德尔发现遗传因子并证实了其传递规律和化学本质
B. 噬菌体侵染细菌实验比肺炎双球菌体外转化实验更具说服力
C. 沃森和克里克提出在 DNA 双螺旋结构中嘧啶数不等于嘌呤数
D. 烟草花叶病毒感染烟草实验说明所有病毒的遗传物质是 RNA
B
一、DNA是遗传物质的证据
1.间接证据(早期推测)
2.直接证据
(1)肺炎双球菌转化实验
①格里菲思转化实验(体内转化)
②艾弗里转化实验(体外转化)
(2)噬菌体侵染细菌实验
二、DNA是主要的遗传物质
小结:
生物的遗传物质
无细胞结构
真核生物和原核生物
一切生物的遗传物质是核酸,DNA是主要的遗传物质
有细胞结构
病毒
DNA
RNA 或 DNA
三、结论:
1.肺炎双球菌的转化实验
(1) 加热杀死的S型细菌能使R型活细菌发生转化的原因:①加热到一定温度,蛋白质的分子结构(空间结构)会被破坏而变性,从而丧失生物活性。因此,加热引起蛋白质变性是导致S型细菌死亡的原因。
②S型细菌体内的DNA热稳定性较高,把DNA溶液加热至沸点,可使其氢键断裂,双螺旋解体,但若将其缓慢冷却,分离的单链又可部分地得以重聚,恢复其双螺旋结构。因此,在一定温度范围内,加热不会导致DNA变性。
③当与R型细菌混合培养时,S型细菌DNA进入R型细菌体内,这叫DNA的转化。
1.肺炎双球菌的转化实验
2.噬菌体侵染细菌的实验
(1)用放射性元素无法直接标记无自主代谢能力的噬菌体,只有用相关元素标记其宿主,再让噬菌体侵染宿主,才能使其增殖,子代被标记。
(2)噬菌体在宿主细胞中的增殖过程包括:吸附―→注入―→合成―→装配―→释放。
(3)从组成化合物的元素可知,S只存在于某些蛋白质中,P主要分布于DNA(核酸)中,故可用其同位素标记两种成分。
(4)虽然细菌转化实验和噬菌体侵染细菌的实验方法不同(前者为直接分离培养法,后者为放射性同位素示踪法),但思路基本一致且都遵循了对照原则。
(5)两个实验的结论都是DNA是遗传物质,而蛋白质不是遗传物质。
2.噬菌体侵染细菌的实验
实验过程中排除干扰因素的常用方法
①将各种物质分开来分别实验。
②用同位素进行示踪(如在噬菌体侵染细菌的实验中用32P和35S分别标记DNA和蛋白质)。
③利用酶的专一性除去某些干扰物质(如在肺炎双球菌的转化实验中选用DNA酶降解DNA作对照实验)。
(1)放射性同位素示踪法的应用
①噬菌体侵染细菌的实验,分别用32P标记DNA,用35S标记蛋白质,观察DNA和蛋白质到底是谁进入细菌细胞体内发挥作用。
②标记光合作用和呼吸作用过程中各种原子的转移,如分别标记水中的O和二氧化碳中的O,用来探究光合作用释放的氧气的来源;标记二氧化碳中的C,用来探究C在植物体内是如何合成有机物的;标记氧气中的O,用来探究呼吸作用产物水和二氧化碳中O的来源。
③标记矿质元素,可以用来探究矿质元素的运输途径和利用过程。
④分别用H标记胸腺嘧啶和尿嘧啶,可以用来探究DNA和RNA的复制、RNA的逆转录、基因的表达(转录和翻译)等。
(2)同位素的选择标准
①特征性元素——如噬菌体侵染细菌的实验。
②所要研究的元素——如光合作用中C、O的标记等。
(1)放射性同位素示踪法的应用